Gebrauchsanweisung

Einfrieren von Zellen in CRYOPAN (im Stickstoffaufbewahrungsbehälter)

  • Einfriermedium, Kulturmedium und Einfrierröhrchen kalt stellen!
  • Zellen trypsinieren, in das Kulturmedium überführen und abzentrifugieren. Den Überstand verwerfen und erneut in das Kulturmedium resuspendieren.
  • Zellzahl einstellen auf 1 - 5 x 106/ml. Die Zellen dabei gut resuspendieren, damit keine Klumpen vorliegen.
  • Die abzentrifugierten Zellen mit dem gleichen Volumen kaltem Einfriermedium mischen und einmal auf- und abpipettieren. Von dieser Zellsuspension in jedes Einfrierröhrchen 1 ml pipettieren.
  • Die Ampullen für 15 Minuten in den Kühlschrank geben, damit das Einfriermedium in die Zellen eindringen kann. Dann für 2 Stunden bei -20° C tieffrieren. Über Nacht in die Gasphase des flüssigen Stickstoffs geben.
  • Anschließend die Einfrierröhrchen in fl. Stickstoff überführen.