Upstream / Downstream
Die Herstellung von Biomolekülen, z.B. Proteinen, besteht aus zwei Hauptschritten: der Upstream- (USP) und der Downstream- (DSP) Verarbeitung. Wir bieten kundenspezifische Produkte wie Kulturmedien, Reagenzien und Pufferlösungen in vielen verschiedenen Größen an, von kleinen Röhrchen bis hin zu 3D-Bags. Sie sind in verschiedenen Qualitätsstufen von Research Use Only (RUO) bis Good Manufacturing Practice (GMP)-Qualität erhältlich, die für Ihre spezifischen Anwendungen geeignet sind.
Zellexpansion / Upstream
Für die Upstream-Prozessierung werden spezielle Zelllinien entwickelt und Zellbanken / Zelllager eingerichtet. Die Zellen, üblicherweise Säugetierzellen oder Mikroorganismen wie Bakterien, werden in geeigneten Kulturmedien kultiviert. Während der Zellvermehrung, die in kleinen Gefäßen beginnt, wird die Kulturgröße schrittweise erhöht, bis die Zellen in große Bioreaktoren transferiert werden können. Das ermöglicht die Produktion spezifischer Biomoleküle im großen Maßstab. Die Zellkulturen werden oft mit Insulin, Transferrin oder zellspezifischen Wachstumsfaktoren ergänzt, um das Zellwachstum und die Ausbeute zu optimieren.
Aufreinigung / Downstream
Die Biomoleküle, z.B. Proteine, müssen aus dem Kulturmedium oder aus dem Inneren der Zellen extrahiert werden. Für solche Extraktionsverfahren werden spezielle Lysepuffer verwendet. Die Moleküle werden über weitere Reinigungsschritte wie Zentrifugation, Filtration und verschiedene Chromatographiemethoden gereinigt, um andere Proteine oder Nukleinsäuren wie RNA und DNA zu entfernen. Während dieser Schritte werden geeignete Pufferlösungen verwendet um definierte Bedingungen während der Aufreinigung wie pH-Wert und Leitfähigkeit aufrecht zu erhalten um Zielproteine zu stabilisieren und vor ungewollten Verunreinigungen zu schützen. Dies gewährleistet die strukturelle und funktionelle Integrität der Biomoleküle während der Downstream-Prozessierung.
Kulturmedien
- Basalmedien (z.B. DMEM/F12, RPMI 1640)
- Komplettmedien (z.B. für CHO, Hybridoma, Stammzellen)
- Serumfreie chemisch definierte Medien
- Kundenspezifische Medien
- Und mehr…
Supplements
- Serumersatz (z.B. Panexin)
- Wachstumsfaktoren (z.B. bFGF, EGF)
- Zytokine (z.B. IL-2, IL-15)
- Antibiotika (z.B. Pen./Strep.)
- Kundenspezifische Supplements
- Und mehr…
Reagenzien
- WFI-Qualitätswasser
- Trennlösungen
- Puffer
- Feed-Lösungen (z.B. Zuckerlösungen < 50 %)
- Kundenspezifische Reagenzien
- Und mehr…
Pufferlösungen
- Für Chromatographie
- Für Zelllyse (z.B: hoch viskose Zuckerlösungen)
- Für Filtration
- Kundenspezifische Pufferlösungen
- Und mehr…
Reagenzien
- WFI-Qualitätswasser
- Detergenzien zur Virusinaktivierung (z.B. Polysorbat 20, Triton X-100)
- Enzymlösungen (z.B. Benzonase)
- Kundenspezifische Reagenzien
- Und mehr…
Zellkulturmedien Supplements
Die Upstream-Prozessierung hat Auswirkungen auf das Zellwachstum, die Produktivität und die Produktqualität. Ein wichtiger Schritt ist die Auswahl und Optimierung der Medien und Zusätze, um das Wachstum und die Vermehrung der Zellen optimal zu unterstützen. Die Zusammensetzung ist entscheidend für das Wachstum und wird oft individuell angepasst, um den Ertrag des gewünschten Produkts zu maximieren.
Vorteile:
- Herstellung in RUO / GMP-ready und GMP-konformer Qualität
- Niedriger Endotoxingehalt, geringe Keimbelastung oder steril
- Chemisch definiert, serumfrei und nicht tierischen Ursprungs
- Optionen zur Anpassung von Medien und Supplements
Puffer Reagenzien
Puffer und Reagenzien werden in fast jedem Prozessschritt von USP und DSP verwendet. Die Qualität der Puffer und Reagenzien spielt eine wichtige Rolle für den Erfolg der einzelnen Prozessschritte. In Upstream-Prozessen werden Puffer und Reagenzien zur Einstellung des pH-Werts und anderer Prozessparameter wie der Glukosekonzentration verwendet. In Downstream-Prozessen werden Puffer und Reagenzien verwendet, um definierte Bedingungen für die Reinigungsschritte aufrechtzuerhalten und um das Zielprodukt zu stabilisieren und die funktionellen Eigenschaften zu erhalten.
Vorteile:
- Herstellung in RUO / GMP-ready und GMP-konformer Qualität
- Niedriger Endotoxingehalt, geringe Keimbelastung oder steril
- DNase- / RNase-frei
- nicht tierischen Ursprungs
- Erhältlich in Hilfsstoffqualität
- Kundenspezifische Formulierungen können leicht umgesetzt werden
Hier finden Sie Beispiele für unsere Produkte, die häufig in verschiedenen Schritten der Upstream- und Downstream-Prozessierung eingesetzt werden:
| Vorgelagerter Prozessschritt | Medien | Ergänzungen/Reagenzien |
| Zellbanking | Gefriermedien: Cryopan I + Cryopan II | DMSO |
| Zellablösung | – | Trypsin EDTA-Lösung EDTA in DPBS (ohne: Ca und Mg) Accumax Zelldissoziationslösung Accutase Zellablösungslösung Kollagenase Typ I, II, III, IV |
| Zellexpansion / Fermentation |
Basalmedien Komplette Medien Serumfreie & chemisch definierte Medien |
WFI Qualitätswasser Pufferlösung z.B. 1 M HEPES Serumersatzstoffe z.B. Panexin Wachstumsfaktoren Zytokine Antibiotika Und mehr… |
| Nachgeschalteter Prozessschritt | Pufferlösung | Reagenzien |
| Zellaufschluss |
Erythrozyten-Lysepuffer Kundenspezifische Pufferlösungen (z.B. mit Zuckerkonzentration < 50%, EDTA oder Triton X-100) |
WFI Qualitätswasser Enzymlösungen |
| Filtration | Maßgeschneiderte Pufferlösungen (z.B. HEPES, MES, Tris) | WFI-Qualitätswasser |
|---|---|---|
| Produktisolierung und -aufbereitung (z. B. Chromatographie) |
Maßgeschneiderte Pufferlösungen mit HEPES, MES, Tris, Urea, Imidazol, Ammoniumsulfat und mehr |
Benzonase-Lösung WFI Qualitätswasser (RNase-/ DNase-frei) |
| Virus-Inaktivierung | Pufferlösung mit Detergenzien (z. B. mit Polysorbat 20, Polysorbat 80 oder Triton X-100) Pufferlösung mit niedrigem pH-Wert (z. B. Zitronensäure, Natriumacetat) |
WFI Qualitätswasser (RNase-/ DNase-frei) |
| Endgültige Formulierung | Essigsäurelösung (RNase- / DNase-frei) Kundenspezifischer Formulierungspuffer (cGMP, Hilfsstoffqualität) |
WFI Qualitätswasser (RNase-/ DNase-frei) |
Anwendungen unserer Produkte in Upstream und Downstream
Unsere Produkte werden in Upstream- und Downstream-Prozessen in einer Vielzahl von Anwendungen eingesetzt. Ausführlichere Informationen finden Sie in den unten aufgeführten Beispielen:
Produkte in orange sind aktuell verfügbar.